賽默飛液質(zhì)聯(lián)用的靈敏度高,通量性能好——優(yōu)異的高流量性能、降低的離子抑制效應(yīng)、自清潔離子源探針設(shè)計(jì)和可靠的接口設(shè)計(jì),加速了分析速度;使用更簡(jiǎn)便。
賽默飛液質(zhì)聯(lián)用作為一種新型的液相色譜技術(shù)。利用待測(cè)樣品中不同組分所帶電荷性質(zhì)、數(shù)量、組分質(zhì)量不同,運(yùn)用色譜技術(shù)進(jìn)行分離分析。能一次性對(duì)多組份無(wú)機(jī)樣品中各種陰或陽(yáng)離子進(jìn)行定性、定量分析,有機(jī)樣品中有機(jī)酸、堿、氨基酸成份進(jìn)行定性、定量分析,賽默飛離子色譜儀廣泛應(yīng)用于食品科學(xué)、飼科行業(yè)、無(wú)機(jī)化工、水質(zhì)分析、農(nóng)村土壤及植物樣品分析。
分離的原理是基于離子交換樹(shù)脂上可離解的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子之間進(jìn)行的可逆交換和分析物溶質(zhì)對(duì)交換劑親和力的差別而被分離。適用于親水性陰、陽(yáng)離子的分離。
高壓輸液泵將流動(dòng)相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送至分析體系,在色譜柱之前通過(guò)進(jìn)樣器將樣品導(dǎo)入,流動(dòng)相將樣品帶入色譜柱,在賽默飛離子色譜儀中各組分被分離,并依次隨流動(dòng)相流至檢測(cè)器。抑制型離子色譜則在電導(dǎo)檢測(cè)器之前增加一個(gè)抑制系統(tǒng),即用另一個(gè)高壓輸液泵將再生液輸送到抑制器。在抑制器中,流動(dòng)相背景電導(dǎo)被降低,然后將流動(dòng)出物導(dǎo)入電導(dǎo)池,檢測(cè)到的信號(hào)送至數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄、處理或保存。非抑制型離子色譜儀不用抑制器和輸送再生液的高壓泵,因此儀器結(jié)構(gòu)相對(duì)比較簡(jiǎn)單,價(jià)格也相對(duì)比較便宜。
賽默飛液質(zhì)聯(lián)用提供的信息:
(1)提供分子量,確定分子式:采用同位素豐度法或高分辨質(zhì)譜求算分子式。
?。?)提供化合物的結(jié)構(gòu)信息:根據(jù)分子離子峰及裂解碎片推斷官能團(tuán)、辨認(rèn)化合物類(lèi)型和推導(dǎo)骨架結(jié)構(gòu)等。
?。?)復(fù)雜混合物的定性定量分析:法分析揮發(fā)油的化學(xué)組成,化合物的裂解在一定的條件下遵循一定的規(guī)律,故比較試樣與標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)譜圖,可為鑒定是否為同一化合物提供依據(jù)。隨著新的離子源不斷出現(xiàn),LC-MS法在結(jié)構(gòu)研究方面發(fā)揮的作用越來(lái)越大,而且更加方便快捷。
賽默飛液質(zhì)聯(lián)用:靜態(tài)儀器有單聚焦磁質(zhì)譜、雙聚焦磁質(zhì)譜;動(dòng)態(tài)儀器有四極桿質(zhì)譜、離子阱質(zhì)譜、飛行時(shí)間質(zhì)譜等。
?。?)四極桿質(zhì)譜:體積小,質(zhì)量輕,價(jià)格低,使用;掃描速度快,適合與色譜連用,定量方面有優(yōu)勢(shì)。但只能做到二級(jí)質(zhì)譜(三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜)。
(2)離子阱質(zhì)量分析器:當(dāng)射頻電壓的zui高值逐漸增高時(shí),質(zhì)荷比從小到大的離子逐次排除并被記錄而獲得質(zhì)譜圖。離子阱質(zhì)譜可以很方便地進(jìn)行多級(jí)質(zhì)譜定性分析,性能好,在剖析物質(zhì)結(jié)構(gòu)、藥物代謝物研究等方面具有zui強(qiáng)大的功能。
?。?)飛行時(shí)間質(zhì)量分析器:離子質(zhì)量越大,到達(dá)接收器所用時(shí)間越長(zhǎng),離子質(zhì)量越小,到達(dá)接收器所用時(shí)間越短,根據(jù)這一原理把不同質(zhì)量的離子按m/z值大小進(jìn)行分離??蓹z測(cè)的分子量范圍大,掃描速度快,儀器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。
?。?)高分辨質(zhì)譜:生物質(zhì)譜要求質(zhì)量分析器的測(cè)定范圍高于普通的有機(jī)質(zhì)譜,多用TOF。離子源常用ESI源和MALDI源(基質(zhì)輔助激光解吸電離)。
?。?)靜電軌道阱質(zhì)譜:屬于高分辨質(zhì)譜。此外,分辨率即分開(kāi)相鄰離子的能力,分辨率越高,越能區(qū)分小的質(zhì)量差。
賽默飛液質(zhì)聯(lián)用除了可以安捷倫液質(zhì)聯(lián)用所不能分析的強(qiáng)極性、難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定性的化合物之外,還具有以下幾個(gè)方面的優(yōu)點(diǎn):
?、俜治龇秶鷱V,MS幾乎可以檢測(cè)所有的化合物,比較容易地解決了分析熱不穩(wěn)定化合物的難題;
?、诜蛛x能力強(qiáng),即使被分析混合物在色譜上沒(méi)有*分離開(kāi),但通過(guò)MS的特征離子質(zhì)量色譜圖也能分別給出它們各自的色譜圖來(lái)進(jìn)行定性定量;
③定性分析結(jié)果可靠,可以同時(shí)給出每一個(gè)組分的分子量和豐富的結(jié)構(gòu)信息;
?、軝z測(cè)限低,MS具備高靈敏度,通過(guò)選擇離子檢測(cè)(SIM)方式,其檢測(cè)能力還可以提高一個(gè)數(shù)量級(jí)以上;
?、莘治鰰r(shí)間快,HPLC-MS使用的液相色譜柱為窄徑柱,縮短了分析時(shí)間,提高了分離效果;
?、拮詣?dòng)化程度高,HPLC-MS具有高度的自動(dòng)化。
賽默飛液質(zhì)聯(lián)用分析方法的建立:檢查已有的色譜條件是否可以離子化、考慮用何種源、決定用正離子還是負(fù)離子、改用揮發(fā)性流動(dòng)相或分離模式、優(yōu)化離子源參數(shù)提高靈敏度、質(zhì)譜不能檢測(cè)沒(méi)有離子化的物質(zhì)。